专题三 植物的组织培养技术
课题一 菊花的组织培养
1.植物组织培养的基本过程
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗,移栽到地里,可以发育成完整的植物体。
2.植物细胞工程的原理:细胞的全能性。
3.植物组织培养技术的应用有:实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工种子;培育作物新品种等。
4.影响植物组织培养的条件
①材料:植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。菊花组织培养一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料(嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化)。
②营养:常用的培养基是MS培养基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
③激素:植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在培养基中植物激素的浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。
使用顺序
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实验结果
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先生长素,
后细胞分裂素
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有利于分裂但不分化
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先细胞分裂素,
后生长素
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细胞既分裂也分化
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同时使用
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分化频率提高
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生长素/ 细胞分裂素比值与结果
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比值高时
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促根分化,
抑芽形成
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比值低时
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促芽分化,
抑根形成
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比值适中
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促进愈伤组织生长
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④环境条件:PH、温度、光等环境条件。
4、操作流程
配制MS固体培养基→外植体的消毒(酒精→氯化汞)→接种→培养→移栽→栽培
注意:①对外植体进行表面消毒时,就要考虑药剂的消毒效果,又要考虑植物的耐受能力。
②栽前应先其在培养间生长几日。然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间,进行壮苗。最后进行露天栽培。
③外植体在培养过程中可能会被污染,原因有外植体消毒不彻底;培养基灭菌不彻底;接种中被杂菌污染等。
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