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课题二 胡萝卜素的提取
1、胡萝卜素性质：橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。
依据碳碳双键的数目划分为α、β、γ 三类。
其中最主要的组成成分为β-胡萝卜素。
2、作用：①治疗夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等疾病；②常用于食品色素；③使癌变细胞恢复成正常细胞。
3、提取β－胡萝卜素的方法主要有三种：①从植物中提取②从大面积养殖的岩藻中获得③利用微生物的发酵生产
4、实验步骤①粉碎：使原料与有机溶剂充分接触，增大溶解度。
②干燥：脱水温度太高，干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。
③萃取
④过滤：除去萃取液中的不溶物
⑤浓缩：蒸发出有机溶剂
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提取方法
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实验原理
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方法步骤
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适用范围
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水蒸气蒸馏
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利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来
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1．水蒸气蒸馏
2．分离油层
3．除水过滤
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适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油
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压榨法
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通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油
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1．石灰水浸泡、漂洗
2．压榨、过滤、静置
3．再次过滤
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适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取
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有机溶剂萃取
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使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油
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1．粉碎、干燥
2．萃取、过滤3．浓缩
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适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中
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相关高考真题
一、（2011新课标卷）39．【生物 ——选修1：生物技术实践】（15分）
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、
和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
二、（2012高考选修1选做题15分，新课标卷）39、为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在ＭＳ培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。回答下列问题：
（1）柚皮易焦糊，宜采用_______法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过_______
除去其中的固体杂质。
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或 接种。对新配制的培养
基灭菌时所用的设备是________________。实验前需对超净工作台进行______处理。
（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其相对分子质量越大，电泳速度______。
（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________ 来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果
四、（2012山东卷）34．（8分）【生物—生物技术实践】
辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。
六、图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的__________和__________过程。
七、图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是__________。培养基中的生长素和细胞
“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动：历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品，版
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 分裂素用量的比值__________（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是__________。
（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是__________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。
（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是____________________。
五、（2010山东卷）34．
【生物—生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是________________法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用_________________________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用___________技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
六、（2009山东卷）34．（8分）（生物一生物技术实践）
人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：
（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行_______。接种前，要对人参根进行 。
（2）用于离体培养的根切块，叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于 污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于 污染。
（3）用少量 酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。 （4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 方法，操作时应采用 加热。
七、2008年山东卷 34（8分）【生物一生物技术实践】
科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。（1）分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的__________、大小及形状不同，在电场中的___________不同而实现分离。（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供_______和________。 （3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的________，确定该蛋白质的抗菌效果。（4）细菌培养常用的接种方法有 ____________和_________。 实验结束后，对使用过的培养基应进行_________处理。
八、2007年山东卷34．（8分）【生物—生物技术实践】乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：
一、玉米秸秆预处理后，因该选用__________酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多选）
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酿制果醋的醋酸菌 B．生长在腐木上的霉菌 C．制作酸奶的乳酸菌 D．生产味精的谷氨酸棒状杆菌 E．反刍动物瘤胃中生存的某些微生物
1、若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为 （按功能分），培养基中的碳源为_________ 。
2、从生物体提取出的酶首先要检测 ，以便更好地将酶用于生产实践。在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用 技术。
（5）发酵阶段需要的菌种是_________，生产酒精是要控制的必要条件是 。
参考答案
三、（1）原油 选择 （2）平板划线法 稀释涂布平板法
（3） 强 （4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
四、（1）大量元素 微量元素 细胞分裂素 （2）IAA的浓度
再生丛芽外植体的比率（m）和外植体上的丛芽平均数（n）
0~0．5mgL-1
（3） 1 （4） 6-BA
五、（1）压榨 过滤 （2）稀释涂布平板法或稀释混合平板法
高压蒸汽灭菌锅消毒 （3）氮源 越慢 （4）直径（或大小）
六、（1）脱分化（或去分化） 再分化
（2）琼脂 低 高压蒸汽灭菌 （3）70% 果胶酶
（4）防止有机溶剂的挥发
七、（1）压榨 萃取 （2）碳源 高压蒸汽灭菌
（3）显微镜直接计数 酶活性 固定化酶 （4）PCR
八、（1）灭菌 消毒 （2）外植体 真菌（霉菌） 细菌
（3）果胶 （4）萃取 水浴
九、（1）电荷 迁移速度 （2）碳源 氮源 （3）数量
（4）平板划线法 稀释涂布平板法 灭菌
十、（1）纤维素 （2）B E （3）选择培养基 纤维素
（4）酶的活力（活性） 固定化酶（ 固定化细胞）
（5）酵母菌 无氧（密闭、密封）
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